無(wú)塵室沉降菌監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

無(wú)塵室沉降菌監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1目的：準(zhǔn)確監(jiān)測(cè)潔凈區(qū)沉降菌落數(shù)，確保生產(chǎn)及檢驗(yàn)區(qū)域空氣中的微生物數(shù)量符合要求，保證產(chǎn)品質(zhì)量。

2范圍：適用于本公司潔凈區(qū)。

3責(zé)任者：生測(cè)組沉降菌監(jiān)測(cè)人員按此標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。

4變更原因：進(jìn)一步完善操作程序，使之更加規(guī)范，合理。

5內(nèi)容：

5.1采樣器皿的清洗與消毒

5.1.1先用清水將培養(yǎng)皿沖洗數(shù)次，再用適宜的毛刷,洗滌液反復(fù)刷洗再用飲用水沖洗至無(wú)氣泡，最后用純化水洗滌晾干。

5.1.2將培養(yǎng)皿放入不銹鋼培養(yǎng)皿筒里再放入電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱250℃干熱滅菌一小時(shí)。 

5.2儀器與設(shè)備

5.2.1超凈臺(tái)，電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、恒溫培養(yǎng)箱、不銹鋼培養(yǎng)皿筒 ， 培養(yǎng)皿，酒精燈。

5.2.2培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基

5.3培養(yǎng)基平皿的制備

5.3.1將培養(yǎng)基加熱熔化，冷至45℃時(shí)，在無(wú)菌條件下操作，將培養(yǎng)基注入培養(yǎng)皿，每皿約15ml～18ml。

5.3.2待瓊脂凝固后，將培養(yǎng)基平皿倒置于30～35℃和23～28.℃培養(yǎng)箱中分別培養(yǎng)48小時(shí)和72小時(shí)確保培養(yǎng)基平皿上無(wú)菌時(shí)方可使用，將制備好的培養(yǎng)基平皿在4～8℃的環(huán)境中存放。

 

5.4采樣方法：將已制備好的培養(yǎng)皿放置在預(yù)先確定的取樣點(diǎn)，打開(kāi)培養(yǎng)皿蓋使培養(yǎng)基表面暴露規(guī)定時(shí)間，再將培養(yǎng)皿蓋上蓋。

5.5培養(yǎng)

5.5.1全部采樣結(jié)束，將培養(yǎng)皿倒置`

5.5.2分別放入30～35℃, 23～28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)，72小時(shí)。

5.5.3每批培養(yǎng)基，做對(duì)照培養(yǎng)，每批培養(yǎng)皿的個(gè)數(shù)不得少于兩個(gè)。

5.6采樣點(diǎn)數(shù)目及最少培養(yǎng)皿數(shù)

5.6.1采樣點(diǎn)數(shù)目

面積(m2)	潔凈度級(jí)別
	100	10.000	100.000
<10	2-3	2	2
≥10-<20	4	2	2
≥20-<40	8	2	2
≥40-<100	16	4	2
≥100-<200	40	10	3
注：表中的面積，對(duì)于單向流無(wú)塵室，指的是送風(fēng)面積，對(duì)于非單向流無(wú)塵室指的是房間面積

5.6.2每十平方米所需培養(yǎng)皿數(shù)

潔凈度級(jí)別	所需培養(yǎng)皿數(shù)（個(gè)）
100級(jí)	每?jī)善椒矫追?個(gè)，每十平方米放14個(gè)。
10.000級(jí)	2
100.000級(jí)	2
300.000級(jí)	2

 

5.6.3采樣點(diǎn)的布置

5.6.3.1工作區(qū)測(cè)試點(diǎn)位置離地面0.8～1.5m（略高于工作面）。

5.6.3.2可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)，采樣點(diǎn)的布置均勻，避免采樣點(diǎn)某局部區(qū)域過(guò)于集中某局部區(qū)域過(guò)于稀疏。

5.7計(jì)算結(jié)果：用計(jì)數(shù)方法得出每個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。每個(gè)測(cè)點(diǎn)的沉降菌的平均菌落數(shù)用公式計(jì)算。          

     平均菌落數(shù)M=（M1+M2+M3+…+Mn）/   n

式中，M——平均菌落數(shù)；

      M1——1號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)；

      M2——2號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)；

      Mn——n號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)；

      N——培養(yǎng)皿總數(shù)；

5.8生產(chǎn)車間檢測(cè)

5.8.1采樣狀態(tài)和時(shí)間

5.8.1.1靜態(tài)：30分鐘；動(dòng)態(tài)：生產(chǎn)過(guò)程全天檢測(cè)，每4小時(shí)換一次培養(yǎng)皿。

5.9 監(jiān)測(cè)頻次：

5.9.1生產(chǎn)車間在產(chǎn)品生產(chǎn)期間，根據(jù)潔凈區(qū)潔凈度等級(jí)分別進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

5.9.1.1百級(jí)及萬(wàn)級(jí)區(qū)，各車間每天應(yīng)監(jiān)測(cè)，但采樣量及采樣數(shù)目可以減少

5.9.1.2表面污染及人體細(xì)菌測(cè)試在無(wú)菌藥品生產(chǎn)期間每天應(yīng)進(jìn)行。

5.9.1.3十萬(wàn)級(jí)區(qū)各車間應(yīng)每周監(jiān)測(cè)一次。

5.9.1.4三十萬(wàn)級(jí)區(qū)各車間應(yīng)每?jī)芍鼙O(jiān)測(cè)一次。

5.10質(zhì)量檢驗(yàn)部應(yīng)對(duì)各車間定期抽檢：靜態(tài)30分鐘；動(dòng)態(tài)4小時(shí)。

潔凈度級(jí)別	10，000級(jí)及100級(jí)	100，000級(jí)	300，000級(jí)
測(cè)試狀態(tài)	動(dòng)態(tài)	動(dòng)態(tài)	動(dòng)態(tài)
測(cè)試頻次	1次/周	1次/月	1次/季

5.11車間在停產(chǎn)后開(kāi)產(chǎn)前的監(jiān)測(cè)按請(qǐng)驗(yàn)單及時(shí)進(jìn)行。

 

 

5.12潔凈度級(jí)別及標(biāo)準(zhǔn)

潔凈度   狀態(tài)及標(biāo)準(zhǔn)	100級(jí)	10000級(jí)	100000級(jí)	300000級(jí)
靜態(tài)（個(gè)/皿）	≤1	≤3	≤10	≤15
動(dòng)態(tài)（個(gè)/皿）	≤1	≤10	≤30	≤50

注：霉菌不得檢出

5.1.3如果測(cè)試結(jié)果全部符合評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，即開(kāi)合格報(bào)告。如果有個(gè)別房間不符合標(biāo)準(zhǔn)，將開(kāi)不合格報(bào)告，要求立即采取措施，直至合格。